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載體名稱：pcDNA6/BioEase-DEST Gateway載體
基本信息
| 出品公司: | Invitrigen |
|---|---|
| 載體名稱: | pcDNA6/BioEase-DEST |
| 質(zhì)粒類型: | Gateway載體；哺乳動物表達載體 |
| 高拷貝/低拷貝: | 高拷貝 |
| 啟動子: | CMV |
| 克隆方法: | Gateway |
| 載體大小: | 6959bp |
| 5 測序引物及序列: | T7 Forward: 5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’ |
| 3 測序引物及序列: | BGH Reverse: 5-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3 |
| 載體標(biāo)簽: | BioEase Tag （N-端） |
| 載體抗性: | 氨芐青霉素、氯霉素（僅空載體） |
| 篩選標(biāo)記: | Blasticidin |
| 克隆菌株: | DB3.1 |
| 宿主細(xì)胞（系）: | 常規(guī)細(xì)胞系，如293、Hela等 |
| 備注: | pcDNA6/BioEase-DEST載體是cDNA的表達與克隆載體； 表達的重組蛋白是生物素標(biāo)記的融合蛋白，生物素標(biāo)記提供了一種高效的檢測和純化手段； 含EK (Enterokinase)切割位點。 |
| 產(chǎn)品目錄號: | K980-01 |
| 穩(wěn)定性: | 瞬表達 或 穩(wěn)表達 |
| 組成型: | 組成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
質(zhì)粒圖譜
載體簡介
生物素?；亟M蛋白表達系統(tǒng) 哺乳動物表達載體pcDNA6/BioEase表達生物素?；娜诤系鞍祝峁┝艘环N簡便、高效的檢測和純化手段。BioEase標(biāo)簽是含72個氨基酸殘基的肽段，體內(nèi)的生物素連接酶系統(tǒng)（ Biotin Protein Ligase），使這段肽鏈上特定的賴氨酸殘基生物素酰化。生物素?；娜诤系鞍卓梢杂面溍褂H和素瓊脂糖珠進行純化。 The pcDNA6-BioEase Gateway Biotinylation System provides an easy, efficient method for expressing, purifying, and detecting biotinylated recombinant proteins. The pcDNA6/BioEase-DEST vector (Figure 1) incorporates a 72 amino acid sequence from K. pneumoniae that directs in vivo biotinylation of a specific lysine residue. This K. pneumoniae tag is recognized and efficiently biotinylated in vivo by a native mammalian system similar to the enzyme Biotin Protein Ligase (BPL) in E. coli(1). Proteins produced from the pcDNA6/BioEase-DEST vector are expressed as fusion proteins to this sequence. Biotinylated fusion proteins can be purified by streptavidin agarose, detected on western blots using streptavidin-HRP or streptavidin-AP conjugates, or visualized in mammalian cells by immunofluorescence with a streptavidin-FITC conjugate (Figure 2). In addition to the 72 amino acid K. pneumoniae sequence, the pcDNA6/BioEase-DEST vector includes the following features: attR sites for fast and efficient recombination with any attL-flanked Gateway entry vector The CMV promoter for high-level expression of the recombinant fusion protein An enterokinase cleavage site for efficient removal of the N-terminal BioEase fusion tag
載體序列
GACGGATCGGGAGATCTCCCGATCCCCTATGGTCGACTCTCAGTACAATCTGCTCTGATGCCGCATAGTT AAGCCAGTATCTGCTCCCTGCTTGTGTGTTGGAGGTCGCTGAGTAGTGCGCGAGCAAAATTTAAGCTACA ACAAGGCAAGGCTTGACCGACAATTGCATGAAGAATCTGCTTAGGGTTAGGCGTTTTGCGCTGCTTCGCG ATGTACGGGCCAGATATACGCGTTGACATTGATTATTGACTAGTTATTAATAGTAATCAATTACGGGGTC ATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTTACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCG CCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCC ATTGACGTCAATGGGTGGACTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCC AAGTACGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTA TGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCATGGTGATGCGGTTTTGGC AGTACATCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAA TGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAACAACTCCGCCCCATTGACG CAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTCTCTGGCTAACTAGAGAACCCA CTGCTTACTGGCTTATCGAAATTAATACGACTCACTATAGGGAGACCCAAGCTGGCTAGCGTTTAAACTT AAGCTTACCATGGGCGCCGGCACCCCGGTGACCGCCCCGCTGGCGGGCACTATCTGGAAGGTGCTGGCCA 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BioVector NTCC Inc.產(chǎn)品分類目錄簡介
Biovector質(zhì)粒載體菌株細(xì)胞株基因庫-NTCC典型培養(yǎng)物保藏中心，可提供數(shù)萬種質(zhì)粒載體、菌株、基因和細(xì)胞株,并可提供實驗技術(shù)外包服務(wù),如基因克隆、質(zhì)粒構(gòu)建、蛋白原核、真核表達及純化、病毒包裝、基因沉默RNAi等服務(wù)。，Biovector NTCC Inc.可為您提供便捷一站式的產(chǎn)品進口服務(wù)，到貨快捷，步驟簡便。
BioVector質(zhì)粒載體菌株細(xì)胞基因保藏中心
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Biovector NTCC中心主頁www.nedfriskphoto.com
資源分類列表網(wǎng)址http://Biovector.1688.com
博客地址http://biovector.blog.163.com
通過Google搜索"Biovector+您所需資源名稱",您一定能找到所需的資源和技術(shù)服務(wù)。
資源涵蓋克隆載體、真核表達載體、原核表達載體、病毒載體、信號通路報告載體、亞細(xì)胞定位載體、熒光蛋白載體、昆蟲細(xì)胞表達載體、啟動子載體、誘導(dǎo)調(diào)控載體等十多種類型上萬個品種。
我們擁有目前最大的cDNA克隆庫、覆蓋30,000個人全長基因的TrueClone cDNA克隆和超過25,000個TrueORF cDNA克隆。利用TrueORF cDNA克隆，我們開發(fā)了大量的全長人重組蛋白產(chǎn)品（哺乳動物細(xì)胞表達），可以進行蛋白功能的研究。另外，Biovector,Inc提供獨特的基因表達產(chǎn)品，如TissueScan cancer qPCR array用于生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)及鑒定。
33,000 種人TrueClones 全長人cDNA克?。o標(biāo)簽）
5,000種 小鼠 TrueClones 全長小鼠cDNA克隆（無標(biāo)簽）
25,000 種人 TrueORF 人ORF cDNA克?。◣?biāo)簽）
12,000種 小鼠 TrueORF 小鼠ORF cDNA克隆（帶標(biāo)簽）
5,000種 人重組蛋白 全長的人重組蛋白（HEK293T細(xì)胞表達）
5,000 種 一抗 經(jīng)鑒定的特異性識別人源蛋白的一抗產(chǎn)品
25,000 種人 HuSH-29 shRNA 預(yù)設(shè)計的shRNA 表達載體（人基因），用于基因沉默
20,000 種小鼠 HuSH-29 shRNA 預(yù)設(shè)計的shRNA 表達載體（小鼠基因），用于基因沉默
10,000種 VERIFY Tagged Antigen 過表達細(xì)胞裂解物（可作為抗原和檢測分析標(biāo)準(zhǔn)品）
240 Luminex Multiplex Assays SNP、轉(zhuǎn)錄因子和microRNA分析
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