• 細(xì)胞名稱：BioVector? CCLF_PEDS_0039_T (人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞)

• DSMZ 編號(hào)： ACC 975

• 物種： 人 (Homo sapiens)

• 細(xì)胞類型： 腎母細(xì)胞瘤 (Wilms tumor)

• 背景來源： 該系于2018年建立，取材自一名2歲患有腎母細(xì)胞瘤并接受過預(yù)治療男童的腎臟。內(nèi)部識(shí)別碼為 CCLF_PEDS1113T。

• 生物安全等級(jí)： 1級(jí)

• 分發(fā)限制： A (常規(guī)分發(fā))

• 細(xì)胞形態(tài)： 扁平、細(xì)長(zhǎng)的成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞，單層貼壁生長(zhǎng)。

• 培養(yǎng)基： 參照 SOP FM 培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)操作程序準(zhǔn)備 FM 培養(yǎng)基，不添加抗生素。

• 傳代培養(yǎng)： 在 T175 培養(yǎng)瓶中接種約 0.5 x 10的6次方個(gè)細(xì)胞。

  • 操作細(xì)節(jié)： 使用 dPBS 清洗并使用 TrypLE Express 消化 10 分鐘。

  • 傳代比例： 每 3-6 周按 1:2 至 1:4 的比例傳代。

  • 重要提示：該細(xì)胞倍增極慢，建議每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基。

  
  

• 培養(yǎng)條件： 37 攝氏度，5% CO2 (二氧化碳)。

• 倍增時(shí)間： 約 3 周。

• 收獲密度： T175 培養(yǎng)瓶滿產(chǎn)約為 1 x 10的6次方個(gè)細(xì)胞。

• 凍存條件： 使用 Recovery Cell Culture Freezing Medium 進(jìn)行凍存。

• 分子遺傳學(xué)： 經(jīng)基因組分析，存在 CTNNB1 c.134C>T (p.S45F) 雜合突變以及 WT1 c.472_473delCG (p.R158fs) 同合或半合突變。DSMZ 通過 RNA-seq 驗(yàn)證了 CTNNB1 突變及 WT1 表達(dá)缺失。

• 鑒定/真實(shí)性： STR 分析符合 ANSI/ATCC 全球標(biāo)準(zhǔn)。

• 支原體檢測(cè)： PCR 檢測(cè)結(jié)果為陰性。

• 病毒檢測(cè)： PCR 檢測(cè)顯示 EBV, HBV, HCV, HIV-1/2, HTLV-1/2, MLV 均為陰性。

• Cell Name:BioVector? CCLF_PEDS_0039_T (Human Wilms Tumor Cell Line)

• DSMZ No.: ACC 975

• Species: Human (Homo sapiens)

• Cell Type: Wilms tumor

• Origin: Established in 2018 from the kidney of a pretreated 2-year-old boy diagnosed with Wilms tumor (Internal CCLF ID: CCLF_PEDS1113T).

• Biosafety Level: 1

• Permissions: A

• Morphology: Flat elongated fibroblastoid cells growing adherently as monolayer.

• Medium: FM Media according to SOP FM media protocol without antibiotics.

• Subculture: Seed at approx. 0.5 x 10 to the 6th cells in a T175 flask.

  • Procedure: Wash with dPBS and use TrypLE Express for 10 minutes.

  • Split Ratio: 1:2 to 1:4 every 3-6 weeks.

  • Note: Extremely slow doubling time; exchange medium every 2-3 days.

  
  

• Incubation: 37 degrees Celsius with 5% CO2.

• Doubling Time: Approximately 3 weeks.

• Harvest Yield: Cell harvest of approx. 1 x 10 to the 6th cells in a T175 flask.

• Storage: Frozen with Recovery Cell Culture Freezing Medium.

• Molecular Genetics: CTNNB1 c.134C>T (p.S45F) heterozygous and WT1 c.472_473delCG (p.R158fs) homo- or hemizygous. CTNNB1 mutation and loss of WT1 expression verified by RNA-seq.

• Authenticity: STR analysis according to ANSI/ATCC ASN-0002.1-2021 confirms an authentic profile.

• Mycoplasma: Negative via PCR assay.

• Viruses: Negative for EBV, HBV, HCV, HIV-1, HIV-2, HTLV-1/2, and MLV via PCR.

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BioVector NTCC質(zhì)粒載體菌種細(xì)胞蛋白抗體基因保藏中心

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