BioVector? HEK293T-SLC35A1-KO 細(xì)胞系是基于廣泛使用的 HEK293T 細(xì)胞開發(fā)的基因敲除株，專門用于優(yōu)化 AAV9 病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效力分析。

• 細(xì)胞名稱: HEK293T-SLC35A1-KO

• DSMZ 編號: ACC 988

• 物種: 人類 (Homo sapiens)

• 細(xì)胞類型: 胚胎腎細(xì)胞 (HEK293T 衍生株)

• 生物安全等級: 1 (德國基因工程法分級為 S1) [x, z]

• 許可與限制: A; D (需遵守相關(guān)分發(fā)與使用限制)

• 建立背景: 2021年利用 CRISPR/Cas9 技術(shù)對 293T (HEK293T) 細(xì)胞進(jìn)行基因編輯而成。 [x]

• 修飾目標(biāo): 敲除了編碼 CMP-唾液酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的 SLC35A1 基因，導(dǎo)致該蛋白水平降低或缺失。 [x]

• 應(yīng)用特性: 由于 SLC35A1 基因的功能性敲除，該細(xì)胞對 腺相關(guān)病毒 9 型 (AAV9) 的轉(zhuǎn)導(dǎo)敏感性顯著增加，因此非常適用于 AAV9 轉(zhuǎn)導(dǎo)效力檢測 (Potency Assays)。 [x]

• 風(fēng)險(xiǎn)評估: 親本 293T 細(xì)胞通過轉(zhuǎn)染腺病毒 5 型 (Ad5) 片段建立，包含 E1a、E1b 和 E4 基因，但不產(chǎn)生具有活性的病毒。 [z]

• 參考文獻(xiàn): 40955 [x]

• 形態(tài)學(xué): 成纖維細(xì)胞樣，貼壁呈單層生長。 [x]

• 培養(yǎng)基: 90% DMEM (高糖) + 10% 熱滅活胎牛血清 (h.i. FBS)。 [x]

• 傳代比例: 待培養(yǎng)物達(dá)到半融合狀態(tài)后，按照 1:10 至 1:20 的比例傳代，每 2-4 天一次。 [x]

• 傳代技巧: 該細(xì)胞貼壁力較弱，無需使用 Trypsin/EDTA，僅通過吹打或輕敲培養(yǎng)瓶即可使細(xì)胞脫落。 [x]

• 接種密度: 80 cm2 培養(yǎng)瓶建議接種量約 1-2 x 10? 個細(xì)胞。 [x]

• 培養(yǎng)條件: 37 °C, 10% CO?（注意：CO? 濃度高于常規(guī) 5%）。 [x]

• 倍增時間: 約 24 小時。 [x]

• 收獲產(chǎn)量: 80 cm2 培養(yǎng)瓶滿瓶收獲量約 15 x 10? 個細(xì)胞。 [x]

• 冷凍保存: 70% DMEM, 20% FBS, 10% DMSO。 [x]

• 支原體檢測: PCR 檢測結(jié)果為陰性。 [x]

• 真實(shí)性檢測: STR 分析證實(shí)其分型與參考數(shù)據(jù)庫中的 293T (ACC 635) 完全一致。 [x]

• 病毒檢測 (PCR): EBV, HBV, HCV, HIV-1/2, HTLV-1/2, MLV 均為陰性。 [x]

Cell Line Datasheet - English Version

• Cell Line Name: HEK293T-SLC35A1-KO

• DSMZ No.: ACC 988 [x]

• Species: Human (Homo sapiens) [x]

• Cell Type: Embryonal kidney (HEK293T derivative) [x]

• Biosafety Level: 1 / GMO-S1 [x, z]

• Permissions/Restrictions: A; D [x]

• Establishment: Established in 2021 via CRISPR/Cas9 mediated modification of the 293T (HEK293T) cell line. [x]

• Modification: Functional knockout of the SLC35A1 gene (encoding CMP-sialic acid transporter), leading to absent or decreased levels of the protein. [x]

• Key Application: This modification results in increased susceptibility to transduction with Adeno-Associated Virus 9 (AAV9), making these cells ideal for AAV9 transduction potency assays. [x]

• Risk Assessment: Parental 293T cells contain fragments of Adenovirus type 5 (E1a, E1b, and E4 genes). No active viruses are produced. [z]

• Reference: 40955 [x]

• Morphology: Fibroblastoid cells growing adherently as a monolayer. [x]

• Culture Medium: 90% DMEM (high glucose) + 10% heat-inactivated FBS. [x]

• Subculture: Split semi-confluent cultures 1:10 to 1:20 every 2-4 days. [x]

• Handling Tip: Cells can be detached simply by pipetting and tapping the flask; Trypsin/EDTA is not required. [x]

• Seeding Density: Approx. 1-2 x 10? cells per 80 cm2 flask. [x]

• Incubation: 37 °C with 10% CO?. [x]

• Doubling Time: Approx. 24 hours. [x]

• Harvest Yield: Approx. 15 x 10? cells per 80 cm2 flask. [x]

• Storage/Freezing: 70% DMEM, 20% FBS, 10% DMSO. [x]

• Mycoplasma: Negative (PCR assay). [x]

• Authenticity: STR profile confirmed as identical to the parental 293T (ACC 635) line. [x]

• Species Validation: Confirmed as human. [x]

• Viral Testing (PCR): Negative for EBV, HBV, HCV, HIV-1, HIV-2, HTLV-1/2, and MLV. [x]

Supplier生產(chǎn)廠家:

BioVector NTCC質(zhì)粒載體菌種細(xì)胞蛋白抗體基因保藏中心

BioVector NTCC Inc.

TEL: 400-800-2947

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