BioVector ^TM AML14.3D10 細(xì)胞株是源自人造血髓系白血病的亞克隆，是目前研究嗜酸性粒細(xì)胞（Eosinophils）最常用的體外模型。與未分化的親本 AML14 不同，3D10 亞系已自發(fā)分化為嗜酸性中幼粒細(xì)胞階段。

• 物種： 人 (Homo sapiens)。

• 細(xì)胞類(lèi)型： 造血髓系白血病；嗜酸性中幼粒細(xì)胞/晚幼粒細(xì)胞。

• 形態(tài)： 圓形、懸浮生長(zhǎng)，胞質(zhì)內(nèi)含有豐富的嗜酸性二級(jí)顆粒。

• 生物安全等級(jí)： BSL-2。

• 倍增時(shí)間： 約 24–36 小時(shí)（受密度影響較大）。

• 培養(yǎng)基：RPMI 1640 + 8% 胎牛血清 (FBS) + 2mM L-谷氨酰胺 + 1mM 丙酮酸鈉 + 50μM β-巰基乙醇。

• 接種密度： 維持在 3 x 10? 至 1 x 10? cells/mL 之間。

• 關(guān)鍵點(diǎn)： 切勿讓密度超過(guò) 1 x 10? cells/mL。過(guò)密會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫顆粒，釋放出的主堿性蛋白 (MBP) 等毒性物質(zhì)會(huì)引發(fā)連鎖死亡。

• 傳代比例： 每 3–4 天按 1:2 或 1:3 比例傳代。

• 顆粒蛋白： 高表達(dá)主堿性蛋白 (MBP)、嗜酸性粒細(xì)胞過(guò)氧化物酶 (EPO) 和嗜酸性粒細(xì)胞衍生神經(jīng)毒素 (EDN)。

• 受體： 表達(dá) GM-CSF 和 IL-5 受體。需注意該亞系已失去 IL-3 受體 α 亞基。

• 細(xì)胞因子依賴(lài)： 增殖不依賴(lài)外源細(xì)胞因子，但對(duì) IL-5 和 GM-CSF 有明顯的生物學(xué)反應(yīng)。

• 凍存液： 90% FBS + 10% DMSO。

• 復(fù)蘇注意事項(xiàng)： 初始復(fù)蘇存活率可能較低（20%–30%）。建議在復(fù)蘇后的前 72 小時(shí)內(nèi)增加補(bǔ)液頻率以稀釋死亡細(xì)胞釋放的顆粒毒素。

BioVector TM

• Organism:Homo sapiens (Human).

• Cell Type: Hematopoietic-Myeloid Leukemia; specifically an eosinophilic myelocyte to metamyelocyte.

• Morphology: Round, non-adherent cells containing abundant eosinophil secondary granules.

• Biosafety Level: BSL-2.

• Doubling Time: Approximately 24–36 hours (some sources report up to 48 hours).

• Growth Medium:RPMI 1640 supplemented with 8% Fetal Bovine Serum (FBS), 2mM L-glutamine, 1mM sodium pyruvate, and 50μM (or 5 x 10?? M) Beta-mercaptoethanol.

• Seeding Density: Maintain between 3 x 10? and 1 x 10? cells/mL.

• Critical Threshold: Do not exceed 1 x 10? cells/mL. Overgrowth causes degranulation, which releases toxic proteins (like MBP) that are fatal to the culture.

• Subculturing: Split every 3–4 days (typically 1 volume old culture to 2 volumes fresh media).

• Granule Proteins: Expresses high levels of major basic protein (MBP), eosinophil peroxidase (EPO), and eosinophil-derived neurotoxin (EDN).

• Receptors: Expresses GM-CSF and IL-5 receptors. Note that this subclone has reportedly lost the α-subunit of the IL-3 receptor.

• Growth Support: Does not require exogenous cytokines for proliferation but responds rapidly to GM-CSF and IL-5.

• Cryopreservation: 90% FBS + 10% DMSO.

• Thawing Caution: Initial viability is often low (20%–30%) due to granule protein toxicity. Frequent medium replacement during the first 72 hours facilitates recovery.

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