MFDpir BioVector?用于轉(zhuǎn)座子誘變和接合轉(zhuǎn)移的大腸桿菌供體菌E. coli

價(jià)　　格：￥99860
貨　　號(hào)：BioVector?MFDpir
產(chǎn)　　地：北京

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BioVector NTCC典型培養(yǎng)物保藏中心: 聯(lián)系人：Dr.Xu, Biovector NTCC Inc.; 電話：400-800-2947 工作微信:1843439339 (QQ同號(hào)); 郵件：[email protected]; 手機(jī)：18901268599; 地址：北京; 已注冊(cè)

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BioVector? MFDpir 菌株（Mu-Free Donor pir+）是一種專門用于轉(zhuǎn)座子誘變和通過(guò)結(jié)合作用（Conjugation）進(jìn)行質(zhì)粒轉(zhuǎn)移的大腸桿菌（E. coli）供體菌。它由巴斯德研究所（Institut Pasteur）開發(fā)，旨在解決傳統(tǒng)供體菌（如 S17-1 λpir）中存在的噬菌體 Mu 污染問(wèn)題。

基本信息

學(xué)名：Escherichia coli MFDpir
母本菌株： MG1655 (K-12 衍生株)
主要功能：作為供體菌，動(dòng)員具有 RP4 來(lái)源 oriT 的質(zhì)粒轉(zhuǎn)移。
開發(fā)機(jī)構(gòu)： BioVector NTCC Inc.

基因型與表型特征

完整基因型： MG1655 RP4-2-Tc::[ΔMu1::aac(3)IV-ΔaphA-Δnic35-ΔMu2::zeo] ΔdapA::(erm-pir) ΔrecA。
Pir 蛋白表達(dá)：含有 pir 基因，能夠支持依賴 Pi (π) 蛋白復(fù)制的質(zhì)粒（如具有 R6K 復(fù)制起始位點(diǎn)的質(zhì)粒）。
DAP 營(yíng)養(yǎng)缺陷型：缺失了 dapA 基因，生長(zhǎng)時(shí)必須添加 0.3 mM 二氨基庚二酸 (DAP)。這使得在接合實(shí)驗(yàn)后，可以通過(guò)去除 DAP 輕松篩選掉供體菌。
抗生素抗性：對(duì)阿普拉霉素 (Apramycin) (30 mg/L)、博來(lái)霉素 (Zeocin) (50 mg/L) 和紅霉素 (Erythromycin) (200 mg/L) 具有抗性。
RecA 缺失：recA 基因的缺失防止了同源重組，確保了質(zhì)粒在菌株內(nèi)的穩(wěn)定性。

培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基：標(biāo)準(zhǔn) LB 肉湯或瓊脂，需額外添加 0.3 mM DAP。
培養(yǎng)溫度： 37 °C。
大氣環(huán)境：需氧。

基因組數(shù)據(jù)

其完整基因組已于 2020 年測(cè)序完成：

登錄號(hào)：NCBI GenBank CP060708。
基因組大?。?/span> 4,686,434 bp。
GC 含量： 50.9%。

BioVector?

The MFDpir strain (Mu-Free Donor pir+) is a specialized Escherichia coli donor strain designed for efficient transposon mutagenesis and plasmid mobilization through conjugation. It was developed by the Institut Pasteur to address the issue of bacteriophage Mu contamination common in older donor strains like S17-1 λpir.

General Information

Scientific Name:Escherichia coli MFDpir
Parent Strain: MG1655 (K-12 derivative)
Function: Donor strain for mobilizing RP4-dependent oriT plasmids.
Origin: BioVector NTCC Inc.

Genotype and Phenotype

Full Genotype: MG1655 RP4-2-Tc::[ΔMu1::aac(3)IV-ΔaphA-Δnic35-ΔMu2::zeo] ΔdapA::(erm-pir) ΔrecA.
Pir Protein Expression: Encodes the pir gene, making it compatible with plasmids requiring the Pi (π) protein for replication (e.g., R6K origin-based plasmids).
DAP Auxotrophy: Contains a deletion in the dapA gene, requiring the addition of 0.3 mM Diaminopimelic Acid (DAP) for growth. This allows for easy counter-selection of the donor strain after conjugation.
Antibiotic Resistances: Naturally resistant to Apramycin (30 mg/L), Zeocin (50 mg/L), and Erythromycin (200 mg/L) due to genetic modifications.
RecA Deficiency: Deletion of recA prevents homologous recombination, ensuring the stability of plasmids.