BioVector? HEK293T CAGA12-Luc/TK Renilla 是一種專門用于監(jiān)測 Activin 和 TGF-β（轉(zhuǎn)化生長因子-β）信號通路的穩(wěn)定雙熒光素酶報告細(xì)胞系。

• 物種： 人源（Human）。

• 組織來源： 胚胎腎臟（Fetal Kidney）。

• 細(xì)胞類型： 上皮細(xì)胞（貼壁生長）。

• 生物安全等級： BSL-2。

• 倍增時間： 約 12–20 小時。

• 主報告基因 (CAGA12-Luc)： 含有 12 個重復(fù)的 CAGA 盒（源自 PAI-1 啟動子），該序列能特異性結(jié)合 Smad3/Smad4 復(fù)合物。當(dāng) TGF-β 或 Activin 激活信號通路時，細(xì)胞會表達(dá)螢火蟲熒光素酶（Firefly Luciferase）。

• 內(nèi)參報告基因 (TK-Renilla)： 由組成型 胸苷激酶 (TK) 啟動子 驅(qū)動，持續(xù)表達(dá)海腎熒光素酶（Renilla Luciferase）。用于校正細(xì)胞數(shù)量、活力及實驗孔間的誤差。

• 篩選抗性：

  • Puromycin (嘌呤霉素)： 用于維持 CAGA12-Luc 的穩(wěn)定性。

  • Blasticidin (殺稻瘟菌素)： 用于維持 TK-Renilla 的穩(wěn)定性。

  
  

• 培養(yǎng)基： DMEM 高糖培養(yǎng)基，添加 10% 胎牛血清 (FBS/FCS)。

  培養(yǎng)環(huán)境： 37°C，5% CO2

• • 生長特性： 貼壁生長；在優(yōu)化條件下倍增時間約為 12–20 小時。

  • 生物安全等級：BSL-2。

  檢測原理 (Assay Mechanism)

  1. 誘導(dǎo)： 當(dāng)加入 TGF-β 或 Activin 時，Smad3 和 Smad4 結(jié)合形成復(fù)合物，并結(jié)合到 CAGA12 啟動子區(qū)域。

  2. 表達(dá)： 結(jié)合后觸發(fā)螢火蟲熒光素酶的表達(dá)。

  3. 標(biāo)準(zhǔn)化： 使用雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)同時讀取兩種信號。通過螢火蟲熒光素酶與海腎熒光素酶的比值，可以消除細(xì)胞活力、接種誤差以及非特異性藥物反應(yīng)帶來的干擾。

  

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  The BioVector? HEK293T CAGA12-Luc/TK Renilla cell line (Catalog #: 156438) is a specialized reporter cell line designed to monitor Activin and TGF-beta (TGF-β) signaling. It utilizes a dual-reporter system for high-sensitivity measurements and internal normalization.
  Core Specifications

  • Host Cell Line:HEK293T (Human Embryonic Kidney), an adherent line known for high transfection efficiency.

  • Reporter 1 (Inducible):CAGA12-Luc. A Smad3/Smad4-dependent Firefly luciferase reporter containing 12 copies of the CAGA box (AGAC motif) from the PAI-1 promoter. It responds to Activin and TGF-β signaling.

  • Reporter 2 (Constitutive):TK Renilla. A Renilla luciferase reporter driven by the thymidine kinase (TK) promoter, used as an internal control for normalization.

  • Selection Markers:Puromycin (conferred by pRetroSuper) and Blasticidin (conferred by pCMV-Bsd).

  • Application: Monitoring of Smad-dependent signal transduction pathways and screening for TGF-β/Activin pathway agonists or antagonists.

  Culture Conditions

  • Growth Medium: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) supplemented with 10% Fetal Calf Serum (FCS).

  • Storage: 1x10^6 cells/vial, typically stored in liquid nitrogen vapor phase for long-term stability.

  • Growth Characteristics: Adherent; doubling time is approximately 12–20 hours under optimal conditions.

  • Biosafety Level:BSL-2.

  Assay Performance

  • Mechanism: In the presence of Activin or TGF-β ligands, Smad3/4 complexes bind to the CAGA12 promoter, triggering the expression of Firefly luciferase.

  • Normalization: The Renilla luciferase signal provides a baseline for cell viability and transfection efficiency, allowing for "dual-luciferase" normalization.

  • Sensitivity: Capable of detecting minute moles of reporter protein with a linear range extending over 7 logs.

  BioVector NTCC質(zhì)粒載體菌株細(xì)胞蛋白抗體基因保藏中心

  E-mail:[email protected]

  電話:400-800-2947

  工作QQ/微信同號:1843439339

  網(wǎng)址 www.nedfriskphoto.com

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