l■ 產(chǎn)品概述：

Escherichia coli J53 (F? met pro Azi^r)is a derivative of E. coli K-12 which is resistant to sodium azide. This strainhas been widely used as a general recipient strain for various conjugationexperiments.

E.coli Chemically CompetentCells K12 Azi^r

產(chǎn)品套裝編號：Biovector-16892A

儲存條件：-80℃保存保存時間：3 Months

產(chǎn)品內(nèi)容

Competent Cells K12Azi^r

包裝規(guī)格

10×100μL

■ 產(chǎn)品儲存：

-80°C保存，避免反復(fù)凍融。

■ 使用步驟：

1.把感受態(tài)細胞置于冰中融化。

2.把100uL的感受態(tài)細胞移至滅菌處理的試管內(nèi)。

3.加入用于轉(zhuǎn)化的DNA（10 ng以下）。

4.冰中放置30分鐘。

5.42℃放置90秒。

6.冰中放置5分鐘。

7.加入37℃預(yù)溫好的SOC培養(yǎng)基，使終體積為1 ml。

8.37℃振蕩培養(yǎng)1小時（160～225 rpm）。

9.6000rpm 離心，棄上清，保留100uL左右菌液重懸混勻后吸取并涂布瓊脂平板培養(yǎng)基。

10.37℃過夜培養(yǎng)。

■ 注意事項：

1. 請用低溫運輸。

2. 不立即使用的感受態(tài)細胞請在-80℃下保存（融化后的感受態(tài)細胞不能再凍結(jié)保存）。

3. 轉(zhuǎn)化時請使用傳熱性能較好的試管。一般的 1.5 ml 微型離心管也可使用，但轉(zhuǎn)化效率會有所下降（此時請在使用方法5.的42℃下放置60秒）。

4. 對100 uL的感受態(tài)細胞，用于轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒DNA量請控制在10 ng以下，并保證DNA 溶液的體積在20 uL以下。否則會影響轉(zhuǎn)化效率。

5. 使用SOC培養(yǎng)基的地方也可使用 LB 培養(yǎng)基，但此時轉(zhuǎn)化效率會有所下降。