■ 產(chǎn)品概述：

Escherichia coli J53 Rif^rGenotype:

met-63 pro-22 Rifr.

Resistance:

Rifampicin

This strain has been widely used as a general recipient strain for variousconjugation experiments.

Competent Cells E.coli J53 Rif^r

包裝規(guī)格

10×100μl

Cat No.:Biovector-16895A

■ 產(chǎn)品儲(chǔ)存：

-80°C保存，避免反復(fù)凍融。

■ 使用步驟：

1.把感受態(tài)細(xì)胞置于冰中融化。

2.把100uL的感受態(tài)細(xì)胞移至滅菌處理的試管內(nèi)。

3.加入用于轉(zhuǎn)化的DNA（10 ng以下）。

4.冰中放置30分鐘。

5.42℃放置90秒。

6.冰中放置5分鐘。

7.加入37℃預(yù)溫好的SOC培養(yǎng)基，使終體積為1 ml。

8.37℃振蕩培養(yǎng)1小時(shí)（160～225 rpm）。

9.6000rpm 離心，棄上清，保留100uL左右菌液重懸混勻后吸取并涂布瓊脂平板培養(yǎng)基。

10.37℃過夜培養(yǎng)。

■ 注意事項(xiàng)：

1. 請(qǐng)用低溫運(yùn)輸。

2. 不立即使用的感受態(tài)細(xì)胞請(qǐng)?jiān)?/span>-80℃下保存（融化后的感受態(tài)細(xì)胞不能再凍結(jié)保存）。

3. 轉(zhuǎn)化時(shí)請(qǐng)使用傳熱性能較好的試管。一般的 1.5 ml 微型離心管也可使用，但轉(zhuǎn)化效率會(huì)有所下降（此時(shí)請(qǐng)?jiān)谑褂梅椒?/span>5.的42℃下放置60秒）。

4. 對(duì)100 uL的感受態(tài)細(xì)胞，用于轉(zhuǎn)化的質(zhì)粒DNA量請(qǐng)控制在10 ng以下，并保證DNA 溶液的體積在20 uL以下。否則會(huì)影響轉(zhuǎn)化效率。

5. 使用SOC培養(yǎng)基的地方也可使用 LB 培養(yǎng)基，但此時(shí)轉(zhuǎn)化效率會(huì)有所下降。