pYSEAP plasmid

pYSEAP分泌型堿性磷酸酶報告載體, 帶有EF1alpha啟動子，SEAP分泌型堿性磷酸酶報告基因可做發(fā)光檢測，帶有Blasticidin殺稻瘟菌素真核篩選抗性標記.

分泌型堿性磷酸酶(SEAP)：SEAP是人胎盤堿性磷酸酶的突變體，無內源性表達。SEAP缺乏胎盤堿性磷酸酶羧基末端 的24個氨基酸。其優(yōu)點是無需裂解細胞，只用培養(yǎng)介質即可檢測酶活性，便于進行時效反應試驗。以間硝基苯磷酸鹽(PNPP) 為底物時可用標準的比色法測定酶活性，操作簡單，反應時間短，價格廉價，但靈敏度低。以黃素腺嘌呤二核苷酸磷酸 為底物進行比色測定，其靈敏度增高。SEAP可催化D—熒光素—O—磷酸鹽水解生成D—熒光素，后者又可作為熒光素 酶的底物，此即兩步生物發(fā)光法檢測酶活性的原理。此方法靈敏度高，接近于熒光素酶報告基因的檢測。還可用一步化學 發(fā)光法檢測酶活性。

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